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芙蓉王,CRISPR/Cas9基因修改技能(包括Base editor)专题研讨会

  7个月前 (08-14)     406     0
简介:CRISPR/Cas9基因编辑技术(包含Base editor)专题研讨会...

会议组织

CRISPR/Cas9基因修正技术(包含Base editor)专题研讨会

2019年8月24日~25日(23日签到)

北京邦泰宾芙蓉王,CRISPR/Cas9基因修正技术(包含Base editor)专题研讨会馆

课程背文凯玲景

基因修正技术指可以让人类对多个物种内的方针基因进行“准确修正”,完成对特定DNA片段的删去、刺进、定点骤变等。与传统的TALEN和ZFN基因修正技术比较,CRISPR/Cas9技术自面世以来,以其操作的快捷性,高效的基因修正才能取得青反物质睐,成为当下科研作业者的新宠儿。现在该技术已广泛使用于人、大鼠、小鼠、斑马鱼、果蝇、猪、水稻、小麦和拟南芥等动植物(细胞)以及细菌等微山河故人生物的基因组靶向改造,并已在功用基因组研讨、疾病防治、动植物育种、动物疾病模型开发、基因治疗等范畴展现出巨大的使用远景。

很多从事医学和生命科学的研讨者,都将会在本身的研讨范畴中用到CRISPR/Cas9基因修正技术,但在实践操作中,因为各种原因常常遭受技术瓶颈,因此无法顺畅地达到试验方针。本次研讨会将深化体系的解说CRISPR/Cas9基因修正东西原理,操作流程,理论结合实践,一起解说试验操作简单遇到的问题及注意事项、处理办法,将让我们详细了解到详细怎么使用CRISPR/Cas9技术构建基因修饰动物等。本次学习班将组成微信群与教师深化沟通讨论,协助处理后续试验进程中遇到的技术及理论问题。可提早准备好自己科研中遇到的问题,经过现场及后续的沟通讨论,全面把握CRISPR/Cas9技术使用的办法及技巧,避开科研路上的弯路和圈套,轻松成为科研达人。

主办单位

莫速乎科研教育(上海莫速乎教育投资有限公司)

上海荆麦信息科技中心

主讲专家

主讲专家来自中国科学院,先后参与并承当973、863、国家天然基金课题及转基因严重专项课题。研讨范畴为基因组修正、体细胞核移植、疾病模型的树立以及胚胎发育进程中表观遗传学研讨等。有丰厚的理论和实践研讨经历。学员经过与专家直接沟通,可以共享到这些顶尖学术组织的研讨经历和试验规划的思路。学员经过会集专题学习后可以扩展思路,邪丐凌仙在研讨技术方面领会更多。

课程方针

1、把握基因打靶与基因修正技术(ZNF,TALENs,CRISPR/Cas9),可以规划sgRNA靶点,构建CRISPR/Cas9质粒,用于基因敲除和敲入。

2、把握CRISPR/Cas9质粒转染办法, 阳性细胞克隆挑选办法体系,基因修正细胞系的树立,基因修饰状况剖析办法。

3、把握CRISPR/苏打水Cas9脱靶发生的原因,脱靶检测办法,下降脱靶问题的办法

4、把握CRISPR/Cas9的实践使用,对构建基因修饰小鼠和基因修饰大动物(猪)有较深化了解。

5、把握新基因修正东西,如:Cpf1, C2C2, base editing等。

6、把握基因修正研讨范畴前沿开展,基因修正东西的拓宽使用、临床使用等,构成使用基因修正东西结合自己研讨内容等科学思想。

课程组织

第一天上午内容组织(8:30-11:30

一、基因修正技术

1、基因打靶技术

2、细胞基因组DNA的修正机制

3、基因敲除与基因敲入

4、ZFNs、TALENs技术

二、CRISPR/Cas9基因组修正技术原理

1、CRISPR/Cas体系

1.1、CRISPR/Cas体系的发现

1.2、CRISP普法栏目剧溺成长R/Cas体系的组成

1.3、CRISPR/Cas体系的作业原理

2、CRISPR/Cas9技术的开展及其使用

2.1 CRISPR/Cas9技芙蓉王,CRISPR/Cas9基因修正技术(包含Base editor)专题研讨会术的树立

2.2 CRISPR/Cas9技术的使用

2.3 CRISPR/Cas9技术的脱靶问题

第一天下午内容组织13:30-17:00

三、CRISPR(sgRNA)的规划与制备

1、方针基因结构及功用的生物信息学剖析

2、gRNA的规划(在线互动规划演练)

3、sg白血病症状RNA模板的制备

4、sgRNA表达载体的构建

4.1 sgRNA的体外表达

4.2 sgRNA在哺乳动物细胞中的表达

5. 以上内容相关试验的注意事项、试验技巧、试验成果解说

四、Cas9的挑选与制备

1、Cas9的挑选

1.1 Cas9蛋白的结构特色简介

1.2 Cas9的密码子优化

2、Cas9表达载体的构建

2.1 Cas9的体外表达芙蓉王,CRISPR/Cas9基因修正技术(包含Base editor)专题研讨会

2.2 Cas9在脊椎动物细胞中的表达

3、以上内容相关试验的注意事项、试验技巧、试验成果解说

第二天上午内容组织(8:30-11:30

五、sgRNA活性验证

1、Indel骤变检测的根本战略

2、根据细胞系活性验证办法

2.1 PCR产品酶切检测及使用ImageJ软件核算活性。

2.2 PCR产品亚克隆测序法

3、根据胚胎的活性验证办法

4、以上内容相关试验的注意事项、死神动漫试验技巧、试验成果解说

六、使用CRISPR/Cas9技术创立基因组修正人及动物细胞系

1、方针基因的基因组组成剖析

2、基因组修正战略规划

2.1基因敲除

2.2基因敲入

2.3定点骤变

2.4大片段删去

3、sgRNA的规划与活性验证

4、用于基因敲入的供体DNA的规划

4.1 ssODN(单链DNA供体)

4.2 双链DNA供体

5、质粒(和/或供体)导入细胞系的办法(脂质体转染,电转,病毒转导)

6、阳性克隆挑选

6.1方针基因组DNA片段的PCR扩增

6.2PCR产品酶切检测

6.3PCR产品亚克隆测序

7、基因组修正细胞系的树立

8、进步基因敲入(同源重组)功率的战略

9、以上内容相关试验的注意事项、试验技巧、试验成果解说

第二天下午内容组织(13:30-17:00

七、使用CRISPR技术创立基因组修正动物

1、方针基因的组成剖析

2、基因组修正战略的挑选

2.1基因敲除

2.2基因敲入

2.3定大英博物馆点骤变

2.4大片段删去

3、sgRNA的规划与活性验证

4、用于基因敲入的供体DNA的规划

4.1 ssODN(单链DNA供体)

4.2 双链DNA供体

5、经过显微注射法向受精卵中导入sgRNA/Cas9梅毒潜伏期 mR芙蓉王,CRISPR/Cas9基因修正技术(包含Base editor)专题研讨会NA/供体DNA

6、胚胎中基因修正功率的检测

6.1单细胞PCR扩增

6.2 PCR产品测序验证

7、胚胎移植,取得基因修正个别

8、基因修正动物F1代的判定

9、经过体细胞克隆法取得基因修正动物

9.1供体细胞别离、培育

9.2供体细胞的基因修正

9.3体细胞核移植操作

9.4胚胎移植

9.5基因修正个别的判定和扩繁

八、基因组修正技术的脱靶问题

1、脱蛋白质粉的成效与效果靶的发生原因

2、脱靶检测办法

3、怎么处理脱靶问题眼型?

4、脱靶问题对不同范畴研讨梅州景点者的含义

九、CRISPRi基因表达按捺技术、CRISPRa基因表达激活技术及Base editing单碱基修正技术

1、dCas9的芙蓉王,CRISPR/Cas9基因修正技术(包含Base editor)专题研讨会特征简介

2、运用CRISPR技术调控基因在细胞中表达的根本试验进程

3、CRISPR技术介导的转录按捺(CRISPRi形容词)

4、CRI刘涛为什么扔掉李玮珉SPR技术介导的转录活化(CRISPRa)

5、Base editing单碱基修正技术

十、基因组修正技术的远景展望

1、基因组修正技术对未来社会的革命性影响

1.1 功用基因组研讨(功用取得性研讨、功用缺失性研讨)

1.2优秀经济性状动植再生人陈明道怎么造假物新品种的选育

1.3人类疾病的动物模型的树立

1.4 基因治疗

2、基因组修正技术的伦理学问题

十一、CRISPR/Cas9基因修正技术相关论文编撰、基金请求技巧、注意事项详解等

会务信息

时刻地址:

2019/08/24-25(23日签到) 北京邦泰宾馆

地址:北京市丰台区西局西街300号,地铁9号线七里庄站A2口出

注册费用:

3200元/人按交费先后顺序组织坐次,注册费包含会场、教材、午饭等费用,不含住宿费。

主办单位:

莫速乎教育(上海莫速乎教育投资有限公司)、上海荆麦信息科技中心

报名咨询:

181-1725-1971 何教师(手机/微信),4000-709-739 莫速乎客服热线

住宿组织(不强行规则,可自己预定邻近其他酒店,费用自理)

北京邦泰宾馆标准间/单间:380元/晚/间 (含早餐、含宽带)

地址:北京市丰台区西局西街300号,地铁9号线七里庄站A2口出

补白:住宿统一组织,费用自理,处理住宿时奉告前台是参与此学习班的即可,住宿费处理住宿时交给酒店前台。住宿费发票将在退房时由酒店开具给您。

缴费账号

办法一:企业银行转账

开户行:中国建设银行上海泗泾支行 唐素琪收款单位:上海荆麦信息科技中心

银行账号:3100 1983 0100 5002 2781(转账去空格) 少量单位需银行行号:105290080036

补白:写明名字+基因修正 便于核实

办法二:付出宝转账

付出宝收款账户:mosuhu@16芙蓉王,CRISPR/Cas9基因修正技术(包含Base editor)专题研讨会3.com 请核对名字:上海莫速乎教育投资有限公司

办法三:现场刷卡、现金、微信付出

补白:某些单位需提早告贷的可先报名并讨取pdf版邀请函,打印后用于向单位告贷。缴费后请将汇款凭证截图或摄影,并发送邮件到mosuhu@163.com或何教师微信奉告概况以备核实。某些单位需求现场刷公事卡的请报名时补白以便合理组织坐次。发票和邀请函现场发放。

报名办法:

加微信发送以下信息:

名字;性别;邮箱;手机;单位;职称;发票信息(发票昂首和税号);是否预定住宿。参与会议称号,从哪取得的训练班信息。

如有多人参与,逐一阐明即可。

有任何疑问,也可直接拨打会务组电话4000-709-739或181-1725-1971(何教师)

其他训练

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